飛凡檢測細胞增值能力檢測 ，細胞周期檢測 ，活細胞計數檢測介紹。

活細胞計數是指對培養的細胞進行計數，計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。

在細胞群體中總有一些因各種原死亡的細胞，總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力，由組織中分離細胞一般也要檢查活力，以了解分離的過程對細胞是否有損傷作用。復蘇后的細胞也要檢查活力，了解凍存和復蘇的效果。

用臺盼蘭染細胞，死細胞著色，活細胞不著色，從而可以區分死細胞與活細胞。利用細胞內某些酶與特定的試劑發生顯色反應，也可測定細胞相對數和相對活力。

常用的有平板菌落計數法，是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，將定量的稀釋液進行平板培養，根據培養出的菌落數，可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高，是一種檢測污染活菌數的方法，也是目前國際上許多國家所采用的方法。使用該法應注意：①一般選取菌落數在30～300之間的平板進行計數，過多或過少均不準確；②為了防止菌落蔓延，影響計數，可在培養基中加入0.001%2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。

廣泛應用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗，是最常用的活菌計數法。

細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。細胞周期是一個重要的檢測參數，研究細胞周期變化的影響對于腫瘤的發展及藥物研發有著重要的作用。例如，已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。

細胞周期內有兩個階段最為重要：G1 到 S 和 G2 到 M；這兩個階段正處在復雜活躍的分子水平變化的時期，容易受環境條件的影響，如果能夠人為地進行調控，將對深入了解生物的生長發育和控制腫瘤生長等有重要意義。能夠方便有效地檢測細胞周期的變化，對于藥物研發和疾病研究等都具有重要的意義。

細胞周期一般有幾種檢測方法，如流式檢測法、BrdU(5~溴脫氧尿嘧啶核苷)摻入法及同位素標記法等，尤其是其中的流式檢測法可適用于大量樣品的細胞周期檢測，能急速的分析單個細胞的多種特性，它是現在最經常用到的測定細胞周期的一種很有效的方法，以下就其中的流式細胞儀來進行周期分析和測試。

流式檢測的實驗原理：

1、由于細胞周期各時相的DNA含量不同，可通過特異性與DNA結合染料來檢測細胞內的DNA含量來測定細胞周期。

2、流式中常用碘化丙啶(Propidium，簡稱PI)與DNA結合，其熒光強度與DNA含量成正比。

流式細胞儀的實驗步驟：

1、收集細胞 取適量的對數生長期細胞接種于6cm中，在相應的條件下（如藥物）處理相應時間后，倒去培養基，用胰酶適度消化細胞，離心收集細胞，棄去上清。

2、清洗及固定細胞 用PBS清洗細胞2遍，吸凈離心管殘余的PBS后，加入300μL PBS重懸。

3、洗滌細胞 次日，離心收集細胞，用移液槍吸走上清，用1mL PBS重懸細胞并離心清洗2~3遍。

4、RNA酶消化和PI染色 在避光條件下，每個樣品加入1避光 RNase （10mg/mL）和5和mg/m（5mg/mL）混勻后室溫避光條孵育30min。

5、上機檢測 將檢測樣品轉移到5mL的流式管后用流式細胞儀檢測細胞周期，采用flowjo或modifit軟件進行DNA含量分析。

飛凡檢測生物依托擁有多年服務經驗的技術團隊和先進的儀器設備，并嚴格按照《干細胞制劑制備與質檢行業標準（試行）》中提及的10種必檢項目及檢測要求，快速地為客戶提供全方位的干細胞質量檢測服務。

質量檢測是為了保證干細胞經特定體外處理后對其安全性、有效性和質量可控性進行較全面的質量檢測，包括但不限以下10各方面：

細胞鑒別：細胞形態、遺傳學、代謝酶亞型譜分析、表面標志物鑒定、特定基因表達產物鑒定。

存活率及生長活性：活細胞計數、細胞倍增時間檢測、細胞周期檢測、克隆形成率、端粒酶活性檢測等。

純度和均一性：細胞表面標志物鑒定、遺傳多態性、特定生物學活性。

無菌試驗和支原體檢測：依據現行版《中華人民共和國藥典》中的生物制品無菌試驗和支原體檢測流程。

細胞內外源致病因子檢測：牛源特定病毒的檢測（如使用過牛血清）；豬源細小病毒檢測（如使用過胰酶等豬源材料等。

內毒素檢測：應根據現行版《中華人民共和國藥典》中的內毒素檢測流程。

異常免疫學反應（異體來源）：對人總淋巴細胞增殖、對不同淋巴細胞亞群增殖能力的影響、對相關細胞因子分泌的影響。

致瘤性：免疫缺陷動物體內致瘤試驗。

生物學效力試驗：檢測干細胞分化潛能、誘導分化細胞的結構和生理功能、對免疫細胞的調節能力、分泌特定細胞因子、表達特定基因和蛋白。

培養基及其他添加成分殘余量檢測：牛血清蛋白、抗生素、細胞因子等殘留檢測。